1991 年就有論文證實(shí)：PCR 循環(huán)數(shù)超過 30，條帶不會更亮

PCR 是分子生物學(xué)最基礎(chǔ)、最常用，卻也最容易「翻車」的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。條帶拖尾、彌散、雜帶叢生、擴(kuò)增效率低、孔間差異大、實(shí)驗(yàn)難以重復(fù)…… 這些問題長期困擾科研人員，而絕大多數(shù)失敗并非來自試劑或操作，往往是 PCR 程序設(shè)置不合理。

1991 年，國際權(quán)威期刊 Nucleic Acids Research 就發(fā)表經(jīng)典研究證實(shí)：PCR 循環(huán)數(shù)超過 30 個(gè)周期后，特異性產(chǎn)物產(chǎn)量不再上升，反而持續(xù)下降；繼續(xù)增加循環(huán)會出現(xiàn)明顯拖尾與非特異性擴(kuò)增；循環(huán)數(shù)達(dá)到 44 時(shí)，目標(biāo)條帶幾乎完全消失。

1990 年，Nucleic Acids Research 另一篇論文研究證實(shí)：PCR 退火溫度直接決定擴(kuò)增特異性，溫度過低易引發(fā)非特異性雜帶，溫度過高會導(dǎo)致擴(kuò)增失敗，合理優(yōu)化退火溫度是獲得清晰可靠條帶的關(guān)鍵。

PCR 想要穩(wěn)定、高效、可重復(fù)，可以考慮遵循標(biāo)準(zhǔn)化參數(shù)邏輯。以下為實(shí)驗(yàn)室通用 PCR 核心公式，可直接套用。

表 1 PCR 核心參數(shù)干貨表

表 2 常見問題快速修正表

綜上，合理的程序設(shè)置是 PCR 成功的前提，而精準(zhǔn)、穩(wěn)定、均勻的溫控系統(tǒng)，則是讓參數(shù)真正落地、實(shí)驗(yàn)結(jié)果高度一致的硬件保障。

伯樂新一代 PCR 熱循環(huán)儀：讓實(shí)驗(yàn)參數(shù)真正落地

掌握了 PCR 優(yōu)化的核心邏輯后，一臺性能可靠的熱循環(huán)儀，能讓實(shí)驗(yàn)成功率直接翻倍。深耕 PCR 領(lǐng)域 40 余年的 Bio-Rad 伯樂，憑借深厚技術(shù)積累推出全新 PTC Tempo 與 PTC Harmony 系列熱循環(huán)儀，以精準(zhǔn)溫控、智能操作、穩(wěn)定性能，為現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供一站式解決方案。

Bio-Rad 新款 PTC Tempo 和 PTC Harmony 熱循環(huán)儀面向現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室,適用于科研院校和生物醫(yī)藥研發(fā)質(zhì)檢場景,在保持熱性能的同時(shí)增加了智能化操作功能。

PTC Tempo 和 Harmony

熱循環(huán)儀的核心優(yōu)勢

精準(zhǔn)溫控

?六模塊獨(dú)立控溫：采用帕爾貼效應(yīng)技術(shù)，六個(gè)獨(dú)立熱電模塊控制溫度均勻性，在升降溫階段保持穩(wěn)定

?快速升降溫：專利輕量化樣品模塊，加熱冷卻速度快于標(biāo)準(zhǔn)模塊，縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間

?減少邊緣效應(yīng)：模塊設(shè)計(jì)減少邊緣效應(yīng)，保證各孔位實(shí)驗(yàn)的一致性

智能優(yōu)化

? 8 英寸觸摸屏，圖形界面直觀易用

?溫度梯度功能：30～100 °C 范圍內(nèi)可設(shè)置 24 °C 梯度，單次實(shí)驗(yàn)優(yōu)化退火溫度，節(jié)省樣本和試劑

?動(dòng)態(tài)升降溫：算法調(diào)整升降溫速度，使所有孔位同時(shí)達(dá)到設(shè)定溫度，保證孵育時(shí)間一致

現(xiàn)代化操作

?PTC Tempo 系列：

Wi-Fi 無線連接

BR.io 云平臺，支持遠(yuǎn)程監(jiān)控和設(shè)置實(shí)驗(yàn)

自動(dòng)化蓋可集成自動(dòng)化工作流程（PTC Tempo 96/Deepwell/384 型號）

可選安全版軟件，符合 FDA 21 CFR Part 11 要求

?PTC Harmony 系列：

保留核心熱性能

以太網(wǎng)和 USB 連接

手動(dòng)蓋性價(jià)比高

?數(shù)據(jù)安全

云端數(shù)據(jù)自動(dòng)備份

數(shù)據(jù)傳輸和存儲加密

強(qiáng)密碼策略

定期安全測試

產(chǎn)品型號

選擇 Bio-Rad 的理由

40 年 PCR 技術(shù)積累

ISO 13485 質(zhì)量認(rèn)證

完整的技術(shù)支持網(wǎng)絡(luò)

提供 PCR 儀器、試劑、成像分析完整產(chǎn)品線

Bio-Rad PCR 領(lǐng)域的可靠伙伴

配套產(chǎn)品

PCR 試劑：iScript cDNA 合成試劑盒、SsoAdvanced 預(yù)混液系列

電泳系統(tǒng)：Mini-Sub? Cell GT 水平電泳儀系列

成像系統(tǒng)：GelDoc? Go 和 ChemiDoc? Go 凝膠成像系統(tǒng)

分子量標(biāo)準(zhǔn)：EZ Load 系列 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)

立即聯(lián)系預(yù)約產(chǎn)品演示或試用

* Bio-Rad, GelDoc, ChemiDoc和Mini-Sub為Bio-Rad Laboratories, Inc. 在特定區(qū)域的商標(biāo)。本文所使用的所有商標(biāo)均歸其各自所有者所有。? 2026 Bio-Rad Laboratories, Inc.

* 本產(chǎn)品僅用于科研用途，不用于臨床診斷。

內(nèi)容策劃：沈佳鈺

內(nèi)容審核：周育紅

題圖來源：圖蟲創(chuàng)意

參考文獻(xiàn)

[1]. Bell D A, DeMarini D M. Excessive cycling converts PCR products to random-length higher molecular weight fragments[J]. Nucleic Acids Research, 1991, 19(18): 5079.

[2]. Rychlik W, Spencer W J, Rhoads R E. Optimization of the annealing temperature for DNA amplification in vitro[J]. Nucleic Acids Research, 1990, 18(21): 6409-6412.