Adv?Sci?| 程芳/陳紅波/鄭永江團隊開發(fā)BCMA工程化樹突狀細胞外泌體，為多發(fā)性骨髓瘤免疫治療提供全新策略

盡管新藥不斷產生，已顯著改善了多發(fā)性骨髓瘤（Multiple myeloma, MM）患者的生存結局，但該病目前仍無法被治愈，絕大多數患者終將陷入耐藥復發(fā)，仍是血液腫瘤領域面臨的重大臨床挑戰(zhàn)。免疫治療已成為多發(fā)性骨髓瘤的核心治療手段之一，但其療效常被免疫抑制的骨髓微環(huán)境、腫瘤抗原逃逸等問題嚴重限制。

近日，中山大學藥學院（深圳）程芳、陳紅波團隊聯(lián)合中山大學附屬第三醫(yī)院血液科鄭永江團隊在Advanced Science在線發(fā)表題為 BCMA-Engineered Dendritic Cell-Derived Exosomes as Bi-functional Therapeutics Orchestrating Cytokine Sequestration and Immune Activation for Multiple Myeloma 的研究論文。該研究創(chuàng)新性開發(fā)了一種BCMA工程化的異體樹突狀細胞（DC）外泌體治療平臺DB Exo，其兼具可溶性配體高效螯合與宿主抗腫瘤免疫激活的雙重功能，打造出兼具“配體誘餌”與“免疫激活”雙功能的無細胞治療體系，為破解多發(fā)性骨髓瘤治療困境提供了全新策略。

1. 成功構建BCMA工程化DC外泌體平臺，保留完整結構與功能特性

研究團隊通過慢病毒載體將小鼠全長BCMA與EGFP的融合蛋白導入DC2.4 細胞，構建了穩(wěn)定表達BCMA的工程化細胞株，并通過差速超速離心分離得到 DB Exo。表征結果顯示，DB Exo 保留了外泌體典型的杯狀形態(tài)，平均粒徑 143nm，與未修飾的 DC 外泌體無顯著差異；同時穩(wěn)定表達 BCMA-EGFP 融合蛋白，以及 ALIX、CD63、TSG101 等外泌體標志蛋白，且未因基因工程改造丟失 MHCII、CD86 等關鍵免疫功能分子，為其雙功能抗腫瘤效應奠定了完整的結構基礎。體內外實驗進一步證實，DB Exo 可被抗原提呈細胞高效攝取，靜脈注射后能有效歸巢至骨髓腔，精準到達骨髓瘤的核心病理微環(huán)境，為其原位發(fā)揮治療作用提供了先決條件。

2. 高效螯合 APRIL，部分中和 BAFF，精準阻斷骨髓瘤細胞核心生存信號

功能實驗證實，DB Exo 可作為高親和力分子誘餌，實現對骨髓瘤微環(huán)境中關鍵促生存配體的高效清除：對可溶性 APRIL 的螯合效率超過 98%，同時部分降低體系中 BAFF 水平（約 35%），直接從源頭切斷骨髓瘤細胞的生存信號輸入。機制上，DB Exo 介導的配體剝奪，可同時阻斷 NF-κB 經典與非經典雙通路的激活，顯著下調 Ccnb1、Ccne1 等細胞周期驅動分子，以及 Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1 等關鍵抗凋亡蛋白的表達，從增殖與抗凋亡兩個維度抑制骨髓瘤細胞的惡性表型。且研究發(fā)現，BCMA 高表達的骨髓瘤細胞對 DB Exo 的治療更敏感，實現了對高侵襲性、高抗原密度腫瘤克隆的精準殺傷，為差異化清除高抗原密度惡性克隆提供了新思路。

3. 強效驅動 DC 成熟與 T 細胞活化，重塑骨髓免疫抑制微環(huán)境

除了直接的腫瘤殺傷作用，DB Exo 充分發(fā)揮了DC外泌體的免疫調控潛能。研究結果顯示，經BCMA工程化改造后的親代DB細胞較未修飾DC2.4細胞高表達CD80、CD86、MHCII等成熟標志物，由其分泌的DB Exo繼承了相應的免疫激活信號，可促進抗原提呈細胞的成熟活化；在脾細胞與骨髓細胞共培養(yǎng)體系中，DB Exo 可顯著富集 CD8 + 細胞毒性 T 細胞亞群，大幅提升顆粒酶 B、穿孔素、IFN-γ 等細胞毒性效應分子的分泌水平，驅動 T 細胞向功能性抗腫瘤表型分化。在模擬骨髓瘤病理微環(huán)境的骨髓共培養(yǎng)體系中，DB Exo使骨髓中CD11c + 樹突狀細胞比例提升至33.1%，成熟DC比例提升至18.4%，同時使CD8+T 細胞在T細胞群體中的占比提升至約50%，骨髓上清中的 TNF-α、IFN-γ、顆粒酶 B 水平提升 5-7 倍，完成了從免疫抑制到免疫激活的骨髓微環(huán)境重塑。

4. 體內展現強效抗腫瘤活性，兼具優(yōu)異的臨床轉化安全性

在體內療效驗證中，研究團隊構建了臨床相關的骨髓瘤原位小鼠模型與皮下荷瘤模型。結果顯示，DB Exo治療可使原位模型小鼠的腫瘤負荷降低約72%，皮下模型的腫瘤重量降低約75%，顯著抑制了骨髓瘤的原位進展與髓外生長，展現出極強的體內抗腫瘤活性。安全性評估結果顯示，DB Exo治療不會引起小鼠白細胞、紅細胞等血常規(guī)指標的異常，心、肝、脾、肺、腎等主要臟器無病理損傷、纖維化或炎癥浸潤；且DB Exo僅在腫瘤來源的微環(huán)境信號存在的情況下才會誘導CD8+T細胞的大量擴增，有效避免了非特異性的自身免疫反應，具備優(yōu)異的臨床轉化安全性。

本研究創(chuàng)新性構建了 BCMA 工程化DC外泌體雙功能治療平臺，將 “配體誘餌阻斷” 與 “原位免疫激活” 兩大策略整合于無細胞外泌體體系中，為應對當前BCMA靶向療法所面臨的免疫抑制微環(huán)境與配體冗余信號等挑戰(zhàn)提供了新的解決思路，在多種骨髓瘤模型中實現了高效、安全的抗腫瘤效果。該研究不僅為多發(fā)性骨髓瘤提供了一種極具臨床轉化潛力的無細胞免疫治療新策略，其模塊化的外泌體工程化設計思路，也為其他配體依賴型自身免疫病、惡性腫瘤的治療提供了全新的范式。

原文鏈接：https://advanced.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/advs.75686

制版人：十一

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