Sci Adv | 揭示難治性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎全新治療靶點-滑膜成纖維細(xì)胞P2X7R

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）是一種以持續(xù)性滑膜炎為核心特征的慢性自身免疫病，可導(dǎo)致關(guān)節(jié)進行性破壞、畸形與殘疾，全球約1%人群受累，構(gòu)成重大疾病負(fù)擔(dān)。盡管靶向TNF、IL-6、CD20、JAK等通路的療法不斷問世，但仍有近40%患者對現(xiàn)有藥物應(yīng)答不佳，5%–20%最終發(fā)展為對多種靶向治療均耐藥的難治性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎。滑膜成纖維細(xì)胞是炎癥滑膜中最主要的細(xì)胞組分，在耐藥RA患者中呈現(xiàn)顯著富集，驅(qū)動侵襲性血管翳形成、軟骨與骨破壞。然而，可用于臨床轉(zhuǎn)化的、靶向滑膜成纖維細(xì)胞的關(guān)鍵分子仍亟待發(fā)現(xiàn)。P2X7受體（P2X7R）是ATP激活的配體門控陽離子通道，在自身免疫病中被廣泛關(guān)注，但其在RA滑膜成纖維細(xì)胞中的精準(zhǔn)表達、功能貢獻及治療價值尚未明確。

近日，北京大學(xué)人民醫(yī)院栗占國教授、孫曉麟教授聯(lián)合北京大學(xué)深圳醫(yī)院王慶文教授、北京大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院初明教授及浙江康恩貝制藥金慶平研究員團隊在期刊ScienceAdvances上發(fā)表題為P2X7R of synovial fibroblasts is a potential therapeutic target candidate associated with refractory rheumatoid arthritis的研究性論文，系統(tǒng)闡明P2X7R在難治性RA滑膜成纖維細(xì)胞中特異性高表達，并驅(qū)動侵襲、炎癥、增殖等致病表型。研究團隊利用臨床樣本、單細(xì)胞測序、原代細(xì)胞功能實驗及非人靈長類關(guān)節(jié)炎模型證實：高選擇性人源P2X7R抑制劑EVT-401可顯著抑制滑膜成纖維細(xì)胞異常活化、減輕關(guān)節(jié)炎癥與骨軟骨破壞。機制上，P2X7R通過Notch與細(xì)胞周期通路維持滑膜成纖維細(xì)胞致病狀態(tài)，且特異性富集于多藥耐藥CTAP-F亞型。該研究證實P2X7R是難治性RA的關(guān)鍵治療靶點，為突破多藥耐藥困境提供全新方向。

P2X7R在RA滑膜與滑膜成纖維細(xì)胞中顯著高表達

研究團隊收集RA與OA患者滑膜組織，通過免疫組化、Western blot、流式等方法證實：P2X7R在RA滑膜組織中表達顯著升高，并與滑膜炎分級、CRP水平正相關(guān)。并且RA滑膜成纖維細(xì)胞的P2X7R表達顯著高于OA成纖維細(xì)胞，而高滑膜炎樣本中P2X7R表達顯著高于低/無滑膜炎組。

單細(xì)胞測序證實：P2X7R富集于致病性lining亞群與難治性CTAP-F亞型

基于大樣本RA滑膜單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)，團隊發(fā)現(xiàn)：P2RX7主要富集于PRG4+ lining成纖維細(xì)胞（F-0、F-1），該亞群直接介導(dǎo)關(guān)節(jié)侵襲與破壞。P2RX7在CTAP-F（成纖維細(xì)胞主導(dǎo)型）中表達最高，而CTAP-F是公認(rèn)的多藥耐藥亞型。

進一步通過臨床樣本驗證：治療應(yīng)答差、高DAS28活動度患者的滑膜P2X7R顯著更高。

EVT-401：高選擇性人源P2X7R拮抗劑，強效抑制RA滑膜成纖維細(xì)胞的致病表型

EVT-401是一種高選擇性人源P2X7R小分子拮抗劑，可特異性結(jié)合并抑制人源P2X7R通道功能，對其他P2X家族受體無明顯交叉作用，保證了靶點作用的專一性。體外實驗結(jié)果系統(tǒng)證明，EVT-401能夠通過抑制P2X7R信號通路，對RA 滑膜成纖維細(xì)胞發(fā)揮多重調(diào)控作用：不僅可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡并引發(fā)G1期周期阻滯，從而有效抑制其異常增殖；還能顯著下調(diào) IL-6、MMP-3、DKK-1 等關(guān)鍵炎癥因子與軟骨破壞介質(zhì)的釋放；同時顯著抑制細(xì)胞的遷移與侵襲能力，從根源上阻斷血管翳形成、關(guān)節(jié)侵蝕與破壞的關(guān)鍵病理進程。

轉(zhuǎn)錄組機制：EVT-401抑制細(xì)胞周期、Notch與ECM重塑通路

RNA測序顯示：EVT-401顯著下調(diào)細(xì)胞周期、炎癥反應(yīng)、ECM受體互作、Notch信號等與耐藥RA相關(guān)的核心通路，從轉(zhuǎn)錄水平逆轉(zhuǎn)滑膜成纖維細(xì)胞的致病表型。

非人靈長類模型驗證：EVT-401顯著緩解關(guān)節(jié)炎、保護關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)

鑒于嚙齒類P2X7R與人差異大，團隊使用食蟹猴膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎模型進行進一步研究發(fā)現(xiàn)：EVT-401顯著降低臨床關(guān)節(jié)炎評分、PIP關(guān)節(jié)腫脹率；影像學(xué)與組織學(xué)顯示骨侵蝕、軟骨破壞、滑膜增生、炎細(xì)胞浸潤均顯著減輕。而EVT-401對心、肝、脾、肺、腎無明顯病理損傷，安全性良好。

人源化模型驗證：EVT-401直接抑制人RA SF侵襲軟骨

團隊進一步構(gòu)建人軟骨-RA SF共植入SCID小鼠模型，發(fā)現(xiàn)EVT-401顯著抑制人RA滑膜成纖維細(xì)胞向軟骨侵襲，并降低hP2X7R陽性細(xì)胞面積，直接證明藥物對人細(xì)胞的靶向療效。

本研究系統(tǒng)證實：P2X7R是難治性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞的潛在驅(qū)動靶點；高選擇性抑制劑EVT-401可阻斷增殖、侵襲、炎癥，并在非人靈長類中顯示強效療效與良好安全性；P2X7R可作為生物標(biāo)志物篩選最可能獲益的多藥耐藥患者。該研究完成從靶點發(fā)現(xiàn)→機制闡明→藥物驗證→臨床轉(zhuǎn)化的全鏈條，為難治性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的治療提供全新策略。

文章第一作者為饒佩詩（北京大學(xué)人民醫(yī)院&復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院廈門醫(yī)院），金善釗（北京大學(xué)人民醫(yī)院），肖詩白（北京大學(xué)深圳醫(yī)院），馬銀超（北京大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院），李靜（北京大學(xué)人民醫(yī)院）。

原文鏈接：https://doi.org/10.1126/sciadv.adw9543

制版人：十一

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